ГОСТ Р 52471-2005
Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

ГОСТ Р 52471-2005

Группа С19

     
     
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

КОРМА

Иммуноферментный метод определения микотоксинов

Feedstuffs. Immunoenzyme method of mycotoxin determination


     
ОКС 65.120
ОКП 92 0000

Дата введения 2007-01-01

     
     
Предисловие


     Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения"
     
     Сведения о стандарте
     

1 РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением "Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии" Россельхозакадемии
     

2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 "Методы испытаний агропромышленной продукции на безопасность"
     

3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 29 декабря 2005 г. N 489-ст
     

4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
     
     
     Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте национального органа Российской Федерации по стандартизации в сети Интернет
     
     

1 Область применения

    1 Область применения


     Настоящий стандарт устанавливает иммуноферментный метод определения содержания микотоксинов (афлатоксин ВГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, роридин А, охратоксин А, стеригматоцистин, Т-2 токсин, зеараленон, фумонизин ВГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов) в кормах.
     
     Настоящий стандарт распространяется на зерновые корма, зернобобовые кормовые культуры, искусственно высушенные и грубые корма, продукцию комбикормовой промышленности (комбикорма полнорационные, комбикорма-концентраты), сырье для производства кормов и кормовые добавки, за исключением кормовых добавок минерального происхождения и продукции органического синтеза.
     
     

2 Нормативные ссылки


     В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты:
     
     ГОСТ Р 8.563-96 Методики выполнения измерений
     
     ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Общие требования
     
     ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений
     
     ГОСТ Р ИСО 5725-3-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 3. Промежуточные показатели прецизионности стандартного метода измерений
     
     ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике
     
     ГОСТ Р 51088-97 Наборы реагентов для клинической лабораторной диагностики. Общие технические условия
     
     ГОСТ 8.315-97 Стандартные образцы состава и свойств веществ и материалов. Основные положения
     
     ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования
     
     ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
     
     ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание
     
     ГОСТ 334-73 Бумага масштабно-координатная. Технические условия
     
     ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
     
     ГОСТ 4204-77 Реактивы. Кислота серная. Технические условия
     
     ГОСТ 6709-72 Реактивы. Вода дистиллированная. Технические условия
     
     ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия
     
     ГОСТ 13496.0-80 Комбикорма, сырье. Методы отбора проб
     
     ГОСТ 13586.3-83 Зерно. Правила приемки и методы отбора проб
     
     ГОСТ 13979.0-86 Жмыхи, шроты и горчичный порошок. Правила приемки и методы отбора проб
     
     ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования
     

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
     
     ГОСТ 27262-87 Корма растительного происхождения. Методы отбора проб
     
     ГОСТ 27668-88 Мука и отруби. Приемка и методы отбора проб
     
     Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте национального органа Российской Федерации по стандартизации в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться замененным (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
     
     

3 Термины, определения, обозначения и сокращения

3.1 В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ Р 8.563, ГОСТ Р ИСО 5725-1, ГОСТ Р 51088, а также следующие термины с соответствующими определениями:
     

3.1.1 тест-система: Набор (комплект) специально подобранных реагентов (реактивов) и составных частей, предназначенный для определения одного или нескольких конкретных веществ.
     

3.1.2 основной раствор: Раствор реактива, приготовляемый заблаговременно и необходимый для приготовления других типов растворов.
     

3.1.3 вспомогательный раствор: Раствор, приготовляемый заблаговременно из основного раствора и необходимый для приготовления других типов растворов.
     

3.1.4 рабочий раствор: Раствор одного или нескольких реактивов, приготовляемый непосредственно перед использованием и необходимый для выполнения процедуры анализа.
     

3.2 В настоящем стандарте применяют следующие сокращения:
     
     ИФА - иммуноферментный анализ;
     
     ОП - оптическая плотность;
     
     АГ - антиген;
     

AT - антитела;
     
     АНС - 8-анилин-1-нафталинсульфокислота;
     
     ФДА - о-фенилендиамин.
     
     

4 Сущность иммуноферментного метода определения


     Иммуноферментный метод основан на измерении содержания микотоксинов в пробах с помощью непрямого твердофазного конкурентного ИФА рабочих растворов экстрактов (рисунок 1).
     
     

Рисунок 1 - Основные этапы иммуноферментного метода определения

ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов


Рисунок 1 - Основные этапы иммуноферментного метода определения


     
     Непрямой ИФА основан на способности микотоксинов взаимодействовать со специфичными антителами (AT) в условиях конкуренции с белковым конъюгатом микотоксина, нанесенным на поверхность ячеек планшета, - твердофазным антигеном (АГ).
     
     Аналитический сигнал (регистрируемое значение оптической плотности), измеряющий степень взаимодействия AT с АГ, обратно пропорционален массовой концентрации микотоксина в рабочем растворе.
     
     

5 Прецизионность метода


     Показатели прецизионности метода определены в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-2, ГОСТ Р ИСО 5725-3 и представлены в таблице 1.


Таблица 1 - Показатели прецизионности метода иммуноферментного определения микотоксинов
     

Определяемый компонент

Содержание, мг/кг

Относительное стандартное отклонение повторяемости
ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, %

Относительное стандартное отклонение промежуточной прецизионности
ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, %

Предел повторяемости ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, %

Предел промежуточной прецизионности
ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, %

Афлатоксин ВГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

0,002-0,050

15

18

42

50

Роридин А

0,004-0,100

13

16

36

45

Охратоксин А




Стеригматоцистин






Т-2 токсин

0,020-0,500

12

14

34

39

Зеараленон

Фумонизин BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

0,050-5,000

12

14

34

39


     
     Расхождение между результатами двух параллельных определений, полученных в условиях повторяемости, может превышать предел повторяемости ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов не более одного раза из двадцати.
     
     Расхождение двух результатов анализа, полученных в условиях промежуточной (внутрилабораторной) прецизионности (разное время, разные операторы, разное оборудование), может превышать значение предела промежуточной прецизионности ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов не более одного раза из двадцати.
     
     

6 Требования к условиям выполнения измерений


     Измерения проводят в лабораторных условиях при температуре окружающего воздуха (23±5) °С, атмосферном давлении (97±10) кПа, относительной влажности (65±15)%, частоте переменного тока (50±5) Гц, напряжении в сети (220±10) В.
     
     

7 Средства измерений и вспомогательное оборудование


     При выполнении измерений применяют следующие средства измерений и вспомогательное оборудование:
     
     фотометр вертикального типа фотометрирования с диапазоном измерения оптической плотности 0-2,5 с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного измерения не более ±0,005 в комплекте с интерференционным светофильтром для длин волн 490-492 нм [1];
     
     весы лабораторные по ГОСТ 24104 с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более ±0,0002 г;
     
     цилиндры по ГОСТ 1770 исполнения 1 вместимостью 25, 100, 1000 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов;
     
     колбы по ГОСТ 1770 исполнения 2 вместимостью 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов;
     
     дозаторы пипеточные для объемов доз 0,005-0,05; 0,02-0,2; 1-5 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов [2] в комплектах со сменными одноразовыми наконечниками;
     
     микрошприц МШ-10 вместимостью 0,01 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов [3];
     
     микрошприцы вместимостью 0,1 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов (кат. N Z 10,895-2) и 0,5 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов (кат. N Z 10,897-9), фирма "Алдрич";
     
     шкаф сушильный любого типа, обеспечивающий постоянство температуры (130±5) °С [4];
     
     шкаф холодильный любого типа, обеспечивающий среднюю температуру в холодильной камере не выше 10 °С [5];
     
     дистиллятор любого типа [6];
     
     калькулятор любого типа с логарифмической функцией.
     
     Допускается использование другого оборудования и средств измерений, позволяющих воспроизводить метрологические характеристики, указанные в данном стандарте. Могут быть использованы ГСО состава растворов микотоксинов (ГОСТ 8.315) с аттестованными значениями массовых концентраций и предназначенные для выполнения ИФА.
     
     

8 Реактивы, материалы, посуда


     При выполнении измерений применяют следующие реактивы и материалы:
     
     кислоту серную концентрированную по ГОСТ 4204;
     
     натрий сернистокислый по нормативному документу;
     
     воду дистиллированную по ГОСТ 6709;
     
     ацетонитрил, ч.д.а [7];
     
     препараты микотоксинов, фирма "Сигма":
     
     афлатоксина BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов (кат. N А 6636),
     
     роридина А (кат. N R 7502),
     
     охратоксина А (кат. N O 1877),
     
     стеригматоцистина (кат. N S 3255),
     
     Т-2 токсина (кат. N Т 4887),
     
     зеараленона (кат. N Z 2125),
     
     фумонизина ВГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов (кат. N А 1147);
     
     тест-системы для непрямого твердофазного конкурентного ИФА в комплектации с реактивами AT, АГ, ФК, БУФЕР-ОТ, БУФЕР-Р1, БУФЕР-Р2, СУБСТРАТ, ФДА (приложение А), предназначенные для определения микотоксинов:
     
     афлатоксина ВГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов в диапазоне концентраций 0,00004-0,001 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов [8],
     
     роридина А в диапазоне концентраций 0,00004-0,001 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов [9],
     
     охратоксина А в диапазоне концентраций 0,00008-0,002 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов [10],
     
     стеригматоцистина в диапазоне концентраций 0,00008-0,002 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов [11],
     
     Т-2 токсина в диапазоне концентраций 0,0004-0,01 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов [12],
     
     зеараленона в диапазоне концентраций 0,0004-0,01 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов [13],
     
      фумонизина ВГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов в диапазоне концентраций 0,001-0,1 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов [14];
     
     планшет 96-ячеечный полистироловый наборный [15];
     
     пробирки по ГОСТ 1770 исполнения 1 вместимостью 10 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов;
     
     колбы по ГОСТ 25336 типа Кн вместимостью 100, 500, 1000 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов;
     
     воронки по ГОСТ 25336 В-56-80 ХС;
     
     флаконы вместимостью 2 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, фирма "Сигма" (кат. N Z 11, 508-8);
     
     бумагу фильтровальную лабораторную по ГОСТ 12026;
     
     бумагу масштабно-координатную по ГОСТ 334 марки Н-1.
     
     Допускается использовать другие реактивы и материалы по качеству не хуже указанных в данном стандарте.
     
     

9 Подготовка к выполнению определения

9.1 Подготовка проб
     
     Отбор проб и их подготовка к определению - по методам, указанным в нормативных документах на конкретную продукцию: комбикорма - по ГОСТ 13496.0, зерно - по ГОСТ 13586.3, жмыхи и шроты - по ГОСТ 13979.0, мука и отруби - по ГОСТ 27668, искусственно высушенные и грубые корма - по ГОСТ 27262. Средние пробы следует измельчать до порошкообразного состояния, размол средних проб рассыпных и гранулированных кормов проводить по ГОСТ 13979.0.
     
     При проведении аналитических измерений одновременно используют две параллельные пробы.
     

9.2 Подготовка лабораторной посуды
     
     Лабораторную стеклянную посуду следует мыть хромовой смесью, многократно промывать водопроводной водой и один раз ополаскивать дистиллированной водой. Высушивать посуду необходимо в сушильном шкафу.
     

9.3 Подготовка прибора к работе
     
     Подготовку и проверку фотометра проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации и техническим описанием к прибору.
     

9.4 Приготовление основных и вспомогательных растворов
     

9.4.1 Приготовление раствора для остановки ферментативной реакции
     
     Навеску 1,26 г безводного сернистокислого натрия помещают в колбу вместимостью 500 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов. Цилиндром вместимостью 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют 80,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов воды, вливают в колбу и перемешивают до полного растворения. Цилиндром вместимостью 25 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют 20,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов концентрированной серной кислоты, осторожно вливают кислоту в раствор, перемешивают и колбу закрывают пробкой. Хранят при температуре (23±5) °С в вытяжном шкафу. Срок годности - 6 мес.

9.4.2 Приготовление смеси ацетонитрила и воды
     
     Цилиндром вместимостью 1000 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют 600 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов ацетонитрила и переносят в коническую колбу вместимостью 1000 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов. Затем тем же цилиндром отмеряют 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов дистиллированной воды, переносят ее в колбу, смесь перемешивают несколькими вращательными движениями и колбу закрывают пришлифованной пробкой. Хранят при температуре (23±5) °С. Срок годности - 6 мес.
 

9.4.3 Приготовление основных растворов микотоксинов
     
     По 1 мг кристаллических микотоксинов количественно переносят в мерные колбы вместимостью 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов смесью ацетонитрила и воды (см. 9.4.2).
     
     Содержимое колб тщательно перемешивают до полного растворения микотоксинов, после чего объем в колбах доводят до метки той же смесью, содержимое колб вновь тщательно перемешивают, переносят в колбы вместимостью 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов и закрывают пробкой. Массовые концентрации полученных растворов микотоксинов составляют 0,01 мг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов (10 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов). Основные растворы хранят в холодильнике в колбах, обернутых алюминиевой фольгой. Срок годности основных растворов микотоксинов - 1 год.
 

9.4.4 Приготовление вспомогательных растворов микотоксинов
     
     Вспомогательные растворы микотоксинов хранят в холодильнике во флаконах вместимостью 2 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, обернутых алюминиевой фольгой. Срок годности вспомогательных растворов микотоксинов - 1 год.
     
     Приготовление вспомогательных растворов микотоксинов из основных растворов проводят по 9.4.4.1-9.4.4.3.
    

9.4.4.1 Приготовление растворов афлатоксина BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов и роридина А
     
     Микрошприцем вместимостью 0,01 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют по 0,001 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов основных растворов микотоксинов и переносят их во флаконы вместимостью 2,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов. Микрошприцем вместимостью 0,5 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов добавляют по 1,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов смеси ацетонитрила и воды (см. 9.4.1), плотно закрывают их крышками, тщательно перемешивают раствор и наносят на флаконы маркировку. Концентрации вспомогательных растворов составляют 0,00001 мг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов (0,01 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

).
     

9.4.4.2 Приготовление растворов охратоксина А и стеригматоцистина
     
     Микрошприцем вместимостью 0,01 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют по 0,002 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов основных растворов микотоксинов и переносят их во флаконы вместимостью 2,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов. Микрошприцем вместимостью 0,5 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов добавляют по 1,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов смеси ацетонитрила и воды (см. 9.4.1), плотно закрывают их крышками, тщательно перемешивают раствор и наносят на флаконы маркировку. Концентрации вспомогательных растворов составляют 0,00002 мг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов (0,02 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов)

9.4.4.3 Приготовление растворов Т-2 токсина и зеараленона
     
     Микрошприцем вместимостью 0,01 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют по 0,01 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов основных растворов микотоксинов и переносят их во флаконы вместимостью 2,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов. Микрошприцем вместимостью 0,5 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов добавляют по 0,99 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов смеси ацетонитрила и воды (см. 9.4.1), плотно закрывают их крышками, тщательно перемешивают раствор и наносят на флаконы маркировку. Концентрации вспомогательных растворов составляют 0,0001 мг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов (0,1 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов)

9.4.4.4 Приготовление раствора фумонизина BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов
     
     Микрошприцем вместимостью 0,1 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют 0,1 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов основного раствора микотоксина и переносят его во флакон вместимостью 2,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов. Микрошприцем вместимостью 0,5 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов добавляют 0,9 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов смеси ацетонитрила и воды (см. 9.4.1), плотно закрывают его крышкой, тщательно перемешивают раствор и наносят на флакон маркировку. Концентрация вспомогательного раствора составляет 0,001 мг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов(1,0 мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

).
     

9.5 Подготовка рабочего журнала
     

9.5.1 В рабочем журнале вычерчивают контур, состоящий из двух одинаковых рамок со столбцами по восемь клеток в каждом, число которых соответствует числу полосок планшета, взятых в работу. Целесообразно анализировать число проб, кратное четырем, поскольку в этом случае требуется целое число полосок.
     
     В клетках левой рамки значками 0, К0, К1, К2, КЗ и цифрами, обозначающими номер пробы, указывают расположение вариантов, при этом для вариантов 0 и К1 берут по одной клетке, для остальных - по две и придерживаются хаотического их расположения. Клетки правой рамки оставляют свободными. Форма для записи результатов и пример расположения вариантов приведены в приложении Б.
     

9.5.2 В рабочем журнале вычерчивают таблицу для записи результатов измерений (приложение В).
     
     На масштабно-координатной бумаге вычерчивают перпендикулярные оси координат, наносят на оси абсцисс три разграничительных метки на расстоянии 35 мм друг от друга с цифровыми обозначениями, соответствующими десятичным логарифмам значений массовых концентраций калибровочных растворов микотоксинов К1, К2, К3, и общее обозначение оси - Ig ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов; на оси ординат - девять разграничительных меток на расстоянии 10 мм друг от друга с цифровыми обозначениями от 10 до 90 и общее обозначение оси - ОП/ОПГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксиновГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов100, %.
 

9.6 Подготовка планшета к определению
     
     Для приготовления рабочих растворов реактивов используют дистиллированную воду. Для каждого реактива и раствора используют отдельные сменные наконечники. Здесь и далее приведены расходы реактивов на две полоски планшета, для другого числа полосок - смешиваемые объемы пропорционально изменяют.
     

9.6.1 Приготовление и внесение в ячейки рабочего раствора АГ
     
     Дозатором отмеряют 3,2 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов воды и вливают в пробирку, затем отмеряют 0,8 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива БУФЕР-Р1 и добавляют в ту же пробирку с водой. Дозатором отмеряют 0,02 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива АГ, вливают его в раствор, перемешивают и наносят маркировку АГ. Дозатором отмеряют по 0,165 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора АГ и вливают во все ячейки.
 

9.6.2 Инкубация
     
     Ячейки, заполненные раствором АГ, накрывают стеклянной или пластиковой крышкой, соответствующей размеру планшета, и оставляют на 16 ч в холодильной камере холодильного шкафа.
     

9.6.3 Приготовление рабочего раствора реактива БУФЕР-ОТ
     
     Цилиндром вместимостью 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют 57 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов воды и переносят в коническую колбу вместимостью 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов. Дозатором добавляют 3,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива БУФЕР-ОТ, закрывают колбу пробкой, перемешивают, наносят маркировку ОТ.
 

9.6.4 Отмывка
     
     Раствор из ячеек планшета, оставленный для инкубации в холодильной камере на 16 ч, сливают вытряхиванием. Дозатором отмеряют по 0,25 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора ОТ, вливают во все ячейки, оставляют на 2 мин и сливают вытряхиванием. Процедуру повторяют еще три раза.
     

9.7 Экстракция
     
     Навески проб массой 10 г помещают в конические колбы вместимостью 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов. Цилиндром вместимостью 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют и добавляют к навескам грубых кормов (сено, солома) по 100 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов смеси ацетонитрила и воды (см. 9.4.2), к навескам всех остальных кормов - по 50 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов этой смеси. Колбы закрывают пробками, интенсивно встряхивают 3-4 раза круговыми движениями, не допуская разбрызгивания и попадания содержимого на горлышко и пробку, и оставляют на 16 ч при температуре 18 °С - 22 °С. Затем содержимое колб с навесками проб интенсивно встряхивают 3-4 раза и фильтруют в другие колбы через бумажный фильтр, помещенный на воронку.
     
     После окончания фильтрования колбы закрывают и наносят маркировки, соответствующие номерам проб. Полученные фильтраты именуются далее экстрактами.
     
     

10 Определение микотоксинов

10.1 Приготовление рабочего раствора реактива БУФЕР-Р2
     
     Дозатором отмеряют 9,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов воды, переливают в пробирку, добавляют 1,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива БУФЕР-Р2, перемешивают, наносят маркировку Р2.
     

10.2 Приготовление рабочих растворов экстрактов
     
     Дозатором отмеряют по 0,27 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора Р2 и вливают их в пробирки. Дозатором отмеряют по 0,03 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов экстрактов, вливают в пробирки, перемешивают и наносят маркировки, соответствующие номерам проб. Кратность разбавления экстрактов равна 10. При необходимости может быть использована кратность разбавления экстрактов более 10.
 

10.3 Приготовление рабочего раствора К0
     
     Рабочий раствор К0 используют для дальнейшего разбавления рабочих растворов экстрактов и для приготовления рабочих растворов микотоксинов.
     
     Дозатором отмеряют 1,35 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора Р2 и вливают его в пробирку. Дозатором отмеряют 0,15 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксиновсмеси ацетонитрила и воды (см. 9.4.2). Раствор перемешивают и наносят маркировку К0.
     

10.4 Приготовление рабочих растворов микотоксинов
     
     Объемы рабочих растворов не изменяют в зависимости от числа полосок планшета, взятых в работу.
     

10.4.1 Приготовление рабочих растворов афлатоксина BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, роридина А, стеригматоцистина, Т-2 токсина, зеараленона и охратоксина А
     
     Дозатором в одну пробирку отмеряют 0,27 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора Р2 и в две пробирки - по 0,24 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора К0. Шприцем вместимостью 0,1 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют 0,03 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов вспомогательного раствора микотоксина и вливают в первую пробирку, раствор перемешивают и наносят маркировку К1.
     
     Дозатором отмеряют 0,06 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора К1, вливают во вторую пробирку, раствор перемешивают и наносят маркировку К2.
     
     Дозатором отмеряют 0,06 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора К2, вливают в третью пробирку, перемешивают и наносят маркировку

К3.
     

10.4.2 Приготовление рабочих растворов фумонизина BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов
     
     Дозатором в одну пробирку отмеряют 0,27 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора Р2 и в две пробирки - по 0,27 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора К0. Шприцем вместимостью 0,1 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов отмеряют 0,03 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов вспомогательного раствора микотоксина и вливают в первую пробирку, раствор перемешивают и наносят маркировку К1.
     
     Дозатором отмеряют 0,03 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора К1, вливают во вторую пробирку, раствор перемешивают и наносят маркировку К2.
     
     Дозатором отмеряют 0,03 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора К2, вливают в третью пробирку, перемешивают и наносят маркировку К3.
     
     Концентрации рабочих растворов микотоксинов, приготовляемых по 10.4, и соответствующие им значения десятичных логарифмов приведены в таблице 2.
     
     
Таблица 2 - Концентрации вспомогательных и рабочих растворов микотоксинов (значения десятичных логарифмов концентраций рабочих растворов)

Определяемый компонент

Концентрация вспомогательного раствора, мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

Концентрация рабочего раствора, ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, мкг/ смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов (Ig ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов)

К1

К2

К3

Афлатоксин BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

0,01

0,001 (-3,0)

0,0002 (-3,7)

0,00004 (-4,4)

Роридин А

Охратоксин А

0,02

0,002 (-2,7)

0,0004 (-3,4)

0,00008 (-4,1)

Стеригматоцистин

Т-2 токсин

0,1

0,01 (-2,0)

0,002 (-2,7)

0,0004 (-3,4)

Зеараленон

Фумонизин BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

1,0

0,1 (-1,0)

0,01 (-2,0)

0,001 (-3,0)


     

10.5 Заполнение ячеек 0 и К0
     
     Внесение растворов в ячейки проводят осторожно, не касаясь наконечником их дна и стенок. В три ячейки, обозначенные на контуре значками 0 и К0, дозатором вливают по 0,1 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора К0, а в ячейку 0 вливают дополнительно 0,1 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора Р2.
     

10.6 Заполнение ячеек К1, К2, К3, номер пробы
     
     Дозатором отмеряют по 0,1 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов растворов К1, К2, К3, рабочих растворов экстрактов и вносят в ячейки в соответствии с принятым размещением на контуре.
  

10.7 Приготовление и внесение в ячейки рабочих растворов реактива AT
     

10.7.1 При определении афлатоксина BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, роридина А, стеригматоцистина, Т-2 токсина, зеараленона и фумонизина BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов дозатором отмеряют по 2,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора Р2 и вливают их в пробирки. Дозатором отмеряют по 0,04 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива AT, соответствующего определяемому микотоксину, вливают его в раствор, перемешивают, наносят маркировку AT.
 

10.7.2 При определении охратоксина А дозатором отмеряют 1,8 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора Р2 и 0,2 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива АНС, вливают их в пробирку. Дозатором отмеряют 0,04 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива AT, соответствующего охратоксину А, вливают его в раствор, перемешивают и наносят маркировку AT.
  

10.8 Внесение раствора AT в ячейки
     
     Дозатором отмеряют по 0,1 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора AT, вливают во все ячейки, кроме одной, обозначенной на контуре значком 0.
     

10.9 Инкубация и отмывка
     
     Планшет аккуратно встряхивают, накрывают крышкой и выдерживают 1 ч при температуре 22 °С - 25 °С, встряхивая через каждые 10-15 мин. Отмывку проводят по 9.6.4.
     

10.10 Приготовление рабочего раствора реактива ФК и внесение в ячейки
     
     Дозатором отмеряют 4,0 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора Р2 и вливают его в пробирку. Дозатором отмеряют 0,02 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива ФК, вливают его в раствор, перемешивают, наносят маркировку ФК. Дозатором отмеряют по 0,17 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора ФК и вливают во все ячейки.
 

10.11 Инкубация и отмывка
     
     Инкубацию и отмывку ячеек планшета проводят по 10.9.
     

10.12 Приготовление рабочего раствора реактивов СУБСТРАТ и ФДА и внесение в ячейки
     
     Дозатором отмеряют 3,2 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов воды и вливают в пробирку. Дозатором отмеряют 0,8 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива СУБСТРАТ и 0,02 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов реактива ФДА, добавляют их в воду, перемешивают. Дозатором отмеряют по 0,17 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов полученного рабочего раствора и вливают его в каждую ячейку.
 

10.13 Инкубация
     
     Планшет накрывают крышкой и выдерживают 45 мин в темноте при температуре 22 °С - 25 °С.
     

10.14 Остановка реакции
     
     Дозатором отмеряют по 0,05 смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов раствора для остановки ферментативной реакции (см. 9.4.1) и добавляют во все ячейки, планшет аккуратно встряхивают и оставляют на 10 мин при той же температуре.
     

10.15 Выполнение измерений
     
     Измерение оптической плотности проводят согласно инструкции к данному типу прибора. Значения ОП считывают с точностью до второго десятичного знака и заносят их в журнал сначала в правую рамку формы для записи результатов (см. 9.5.1) и затем в таблицу (см. 9.5.2), располагая в соответствии с номерами вариантов.
     
     

11 Обработка результатов измерений

11.1 Рассчитывают среднеарифметическое значение оптической плотности для ячеек-дублей КО (ОПГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов) и затем - среднеарифметические значения для ячеек-дублей всех остальных вариантов (ОП). Далее вычисляют значения ОП/ОПГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов с точностью до 0,01 и выражают их в процентах.
   

11.2 В подготовленной системе координат точки пересечения найденных значений ОП/ОПГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксиновГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов100% для вариантов К1, К2 и К3 и значений логарифмов концентраций рабочих растворов микотоксина К1, К2 и К3 соединяют. По значениям ОП/ОПГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксиновГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов100% для рабочего экстракта каждой пробы с помощью полученного графика определяют значения логарифмов концентраций микотоксина. Вычислением антилогарифмов этих значений с помощью микрокалькулятора находят соответствующие массовые концентрации микотоксина в рабочих растворах экстрактов в мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов с точностью до 0,00001.

11.3 Содержание микотоксина в каждой параллельной пробе ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, мг/кг, вычисляют по формуле
     

ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, (1)


где ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов - массовая концентрация микотоксина в рабочем растворе экстракта, мкг/смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов;
     
       ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов - навеска пробы, взятая для анализа, г;
     
      ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов - объем смеси ацетонитрила и воды, взятый для экстракции, смГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов;
     
      ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов - кратность разбавления экстракта при приготовлении рабочего раствора.

11.4 За результат определения принимают среднеарифметическое значение результатов измерений, полученных для двух параллельных проб, если выполняется условие приемлемости:
     

ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов, (2)


где ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов и ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов - результаты измерений содержания микотоксина для двух параллельных проб;
     
     ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов - предел повторяемости, приведенный в таблице 1.

     Числовое значение результата определения должно содержать не более двух значащих цифр.
  

11.5 Результат определения содержания микотоксинов в анализируемой пробе в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:
     

ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов мг/кг при доверительной вероятности ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов=0,95,


где ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов - содержание микотоксина в анализируемой пробе, мг/кг;
     
     ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов - стандартное отклонение промежуточной прецизионности, мг/кг.
     
     Значение ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов рассчитывают по формуле
     

ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов,


где ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов - относительное стандартное отклонение, приведенное в таблице 1.
     
     

12 Контроль точности результатов измерения

12.1 Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости (сходимости), промежуточной прецизионности и воспроизводимости, проводится с учетом требований раздела 5 ГОСТ Р ИСО 5725-6.
     

12.2 Процедуры и периодичность контроля точности (контроля стабильности), получаемых результатов измерений в пределах лаборатории, проводят с учетом требований раздела 6 ГОСТ Р ИСО 5725-6.
     
     

13 Требования безопасности

13.1 Условия безопасного проведения работ
     
     При выполнении аналитических измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами.
     
     Электробезопасность при работе с электроустановками - по ГОСТ 12.1.019.
     
     Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.
     

13.2 Требования к квалификации операторов
     
     Выполнение измерений производится лаборантом или химиком-аналитиком, владеющим техникой ИФА и изучившим инструкцию по эксплуатации используемой аппаратуры.
     
     

Приложение А (обязательное). Сведения по комплектации тест-систем

Приложение А
(обязательное)  

1 Реактив AT - антитела к определяемому микотоксину
     

2 Реактив АГ - белковый конъюгат соответствующего микотоксина
     

3 Реактив ФК - антивидовой ферментный конъюгат
     

4 Реактив БУФЕР-ОТ (20-кратный концентрат) - солевой фосфатный буферный раствор с добавлением твина 20
     

5 Реактив БУФЕР-Р1 (5-кратный концентрат) - карбонат-бикарбонатный буферный раствор
     

6 Реактив БУФЕР-Р2 (10-кратный концентрат) - солевой фосфатный буферный раствор с добавлением твина 20 и бычьего сывороточного альбумина
     

7 Реактив СУБСТРАТ (5-кратный концентрат) - фосфат-цитратный буферный раствор с добавлением пероксида водорода
     

8 Реактив ФДА - о-фенилендиамин, 8%-ный раствор
     

9 Реактив АНС - аммонийная соль 8-анилин-1-нафталинсульфокислоты, 0,5%-ный раствор
     
     

Приложение Б (рекомендуемое). Форма для записи результатов

Приложение Б
(рекомендуемое)  

0

К2




1

К0



К3

3



2

4



К2

К1



4

2



К0

1



3

К3



Приложение В (рекомендуемое). Таблица для записи результатов анализа


     
Приложение В
(рекомендуемое)  


Таблица В.1
     

Маркировка варианта

Значение ОП

ОП/ОПГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксиновГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов100, %

lg ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

ГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

по ячейкам

среднее

К0


ОПГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов

100

-

-

К1






К2






К3












Библиография

[1] ТУ 9443-00113270117-96

Фотометр для иммуноферментного анализа ИФА-ОЭП

[2] ТУ 64-16-55-90

Дозаторы пипеточные

[3] ТУ 25-03-2152-76

Микрошприц МШ-10

[4] ТУ 16-6881032-84

Шкаф сушильный

[5] ТУ 27-56-984-84

Шкаф холодильный

[6] ТУ 61-1-721-79

Дистиллятор ДЭ-4-2

[7] ТУ 6-09-5437-91

Ацетонитрил ч.д.а

[8] ТУ 9398-007-42442516-2002

Тест-система для иммуноферментного определения афлатоксина BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов "Афлатоксин ВГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов-ИФА"

[9] ТУ 9398-019-42442516-2002

Тест-система для иммуноферментного определения роридина А "Роридин А-ИФА"

[10] ТУ 9398-013-42442516-2002

Тест-система для иммуноферментного определения охратоксина А "Охратоксин А-ИФА"

[11] ТУ 9398-077-42442516-2002

Тест-система для иммуноферментного определения стеригматоцистина "Стеригматоцистин-ИФА"

[12] ТУ 9398-004-42442516-2002

Тест-система для иммуноферментного определения Т-2 токсина "Т-2 токсин-ИФА"

[13] ТУ 9398-010-42442516-2002

Тест-система для иммуноферментного определения зеараленона "Зеараленон-ИФА"

[14] ТУ 9398-016-42442516-2002

Тест-система для иммуноферментного определения фумонизина BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов "Фумонизин BГОСТ Р 52471-2005 Корма. Иммуноферментный метод определения микотоксинов-ИФА"

[15] ТУ 64-2-375-86

Планшет 96-ячеечный полистироловый наборный


     
     

Последние документы

Copyright © 2018